奶水牛养殖

第二部分:繁殖技术

前言

DB53/T 344《奶水牛养殖》包括以下部分

—第1部分：饲草饲料；

—第2部分繁殖部分；

—第3部分疫病防治与卫生保健；

—第4部分:养殖技术。

本部分是《奶水牛养殖》的第2部分。

本部分根据GB/T1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写》给出的规则进行编写。

本部分是由云南省农业厅提出并归口。

本部分起草单位：云南省家畜改良工作站。大理州家畜繁育指导站、潞西市畜牧站。

本部分主要起草人：刘红文、袁跃云、王鹏武、汤守昆、刘敏

奶水牛养殖

第2部分：繁殖技术

1 范围

DBT/344.2的本部分规定了水牛繁殖技术规范，包括种公牛的选择、细管冷冻精液制作、水牛人工授精技术、母牛发情鉴定以及母牛的妊娠诊断、分娩等技术要求。

本部分适用于奶水牛养殖 。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件

GB-4143-2008 牛冷冻精液

GB/T 5458  液氮生物容器

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1本交

公牛与发情母牛直接交配的繁殖方法，又分为自由交配和人工辅助交配两种方式。

3.2人工授精

利用器械以人工方法采集种公牛精液，经过检查、稀释、冷冻、保存及解冻等特定处理后，再用器械输入发情母牛的生殖道中，使母牛妊娠的一种繁殖技术。

3.3细管冻精

精液冷冻剂型之一。将新鲜精液稀释、平衡后，用精液分装机装入0.25或0.5ml容积的塑料细管并封口，然后平衡冷冻在液氮中保存。

3.4发情鉴定

根据母牛繁殖特性和发情表现，通过多种方法判断母牛是否发情、发情是否正常及所处的阶段。

3.5 发情周期

指从一次发情开始到下一次发情开始、或从一次发情结束到下次发情结束所需的时间。

3.6 妊娠诊断

根据母牛妊娠后发生的一系列生理变化，通过徒手或仪器检查判断母牛是否妊娠。

3.7初乳

    母牛产后5～７天以内的牛奶称为初乳。

4 种公牛的选择和管理

4.1 种公牛的选择

4.1.1用于生产牛冻精的水牛种公牛应有系谱档案和种用合格证，符合本品种特征,外貌等级评价为特级或一级。

4.1.2种公牛应体质健康，无遗传病和《中华人民共和国动物防疫法》中规定的二类疫病

4.1.3引进种公牛要遵守关于种畜禽管理的有关规定并办理合法完善的引种手续后，方可引入。

4.2 种公牛的管理

4.2.1 种公牛要编号打上耳标，由专人单栏饲养。

4.2.2饲养员要细心观察种公牛的饮食；对种公牛每天进行全身刷拭1～2次，温暖季节应边刷拭边冲水；注意保持适当而合理的运动；要经常检查肢蹄情况，发现蹄姿不正时要及时进行修蹄，防止肢蹄病发生。

5 配种方法

    本地水牛纯繁完全采用本交配种；杂交改良则以人工授精为主、本交为辅，两种方法结合以提高受配率和受胎率。

5.1本交

5.1.1本交的原则

牛群集中，并且不具备人工授精条件，或久配不孕，采用本交方法。

5．1．1本交用种公牛选择

5．1．1.1本交用种公牛的选择必须要考虑种用性能和与受配母牛的血缘关系。

5．1．1.2应定期检查公、母牛健康状况，避免疾病通过交配而互相传染。

5．1．1.3发现受胎率明显下降时应及时检查种公牛的精液品质，查明原因。

5．1．2初配年龄与公母比例

    种公牛2.5～3岁开始配种，公牛配种体重要达到成年牛体重的70%，母水牛2.5岁以上可视生长发育情况开始配种；在单纯采用本交情况下，公母牛比例为1︰20～30。

5．1．3配种

平时应将种公牛与母牛分开饲养，当观察到母牛发情时再将其与种公牛一起赶入配种舍交配，或每天早晚定时将种公牛赶入母牛群，以识别出发情母牛并交配。

5．2 人工授精

5.2.1人工授精站建设

人工授精站应具有与输精量相适应的冻精处理室、输精操作室和器械及药品。

5.2.1.1冻精处理室

冻精处理室的面积为8-10㎡,要求墙壁、地面平整，屋顶设置顶棚，安装紫外线消毒灯。室内要保持无尘、无蝇、无菌、无异味。器械药品等须分类放在清洁厨柜内固定的位置。

5.2.1.2输精操作室

输精操作室的面积一般在20-40㎡，要求室内保持干燥，光线充足，地面平整，便于清理粪便；最好与冻精处理室相连接，设3面墙，安置1-2个保定架，用于输精或对母牛进行检查与治疗。

5.2.1.3器械及药品：详见附录A 

5.2.1.4器械消毒

输精器械用后要及时清洗、晾干、消毒备用， 器械可以用蒸汽灭菌消毒，也可以用电热干燥箱或消毒柜消毒，还可以用75%的酒精擦拭或吸注消毒，并用酒精火焰烤干

5.2.2 细管冻精

我省水牛人工授精配种全部使用0.25ml规格的细管冻精。

5.2.2.1冻精生产

细管冻精由取得冻精生产许可证的单位生产，制作和质量要求、标志、包装按GB4143—2008执行。

5.2.2.2冻精运输与贮存

细管冻精采用液氮罐作为运输、贮存容器，液氮罐的使用按GB/T 5458执行。细管冻精从一个容器转移到另一个容器必须在纱布袋或专用高杯中进行。贮存冻精要在冻精贮存记录表进行详细记录。

5.2.2.3冻精使用

经过运输和贮存的冻精在使用前必须进行解冻后的活力检查。冻精的使用要认真填写冻精使用登记表

5.2.3母水牛发情鉴定

性成熟的健康母水牛都具有规律性的发情周期和一定的发情表现，可以通过外部观察法、试情法和一些特殊检查法等，单独或综合鉴定母牛是否发情及发情所处的阶段，把握适时输精时间。

5.2.3.1外部观察

发情母牛会有站立不安，不时抬头张望，在厩内不断走动；鸣叫，采食和反刍减少；有小公牛跟随嗅闻母牛阴户或公牛追爬，爬跨其它母牛或接受同群其它母牛爬跨；拱背举尾、频频排尿等行为表现。发情母牛的外阴会出现湿润、肿胀和流出透明粘液现象。通过观察母牛是否有上述行为表现和阴户变化，可以初步判断其是否发情；通过分析行来表现出现时间和变化，阴户肿胀的程度和流出粘液的数量、颜色、粘稠度以及是否含有血丝等可以判断母牛所处的发情阶段。观察时要注意母牛床的地面上是否掉有粘液，母牛后躯、尾及两后肢是否粘有少量粘液，粘液性状及干固程度。在母牛躺卧休息时（白天或夜晚），观察是否有粘液从阴门流出，这是水母牛发情外表观察最可靠的方法。

5.2.3.2试情法

让母牛接近结扎输精管或佩戴防交配肚兜的健壮公牛，如果公牛追爬母牛，母牛愿意接近公牛表示母牛已发情，母牛站立不动，任由公牛爬跨交配是输精的最后佳时期。

5.2.3.3阴道检查法

用开膣器打开阴道，检查阴道及子宫颈，如果阴道粘膜及子宫颈的颜色潮红、充血、肿胀，阴道内有粘液，子宫颈口的开张，表示母牛已发情；再根据子宫颈开张程度和粘液量及浓稠程度等判断发情进程。

5.2.3.4粘液检查 

在阴道检查的基础上，用棉球或输精枪外套，从子宫颈口处取下粘液，涂制抹片，用酒精灯烘干后在显微镜下放大100～150倍观查。如看到典型的羊齿状结晶，花纹长且整齐，则为发情盛期；缩短为星芒状，则为发情后期。

5.2.3.5直肠检查

用手通过直肠壁触摸母牛卵巢上卵泡的大小、形状、质地等卵泡的发育情况来判断母牛的发情进程，由此确定母牛的排卵时间和适宜的输精时间。

4.2.4输精技术

4.2.4.1 精液品质检查

对每一批次的细管冻精都要进行精液品质的抽查，用显微镜检查精液的活率和密度。

4.2.4.2精液解冻

把温水装入解冻杯中并准确调整到35℃，用镊子把所需冻精从液氮罐内正确取出迅速移入解冻杯中，0.25ml装细管的解冻时间为7s。解冻过程中必须将整支细管浸入温水中，最好用镊子夹住细管在温水牛搅动。解冻完成后用吸水性好的纸巾擦干细管，检查核对细管上的标记是否正确无误。

4.2.4.3输精枪装配

垂直拿住细管封口端，轻轻弹动细管使空气泡到达顶部；将输精枪栓拉出比细管长度稍长，把细管棉塞端优先装入枪管，在突出枪管1厘米左右垂直剪去封口，套上塑料护套并锁紧，轻轻推动枪栓直到护套尖端出现精液小珠。

为避免解冻后的精液过度降温，冬季输精枪很冷时，装枪前应用纸巾摩擦预热，但注意不能使温度过高；输精枪装好后应用纸巾（输精时可作清洁用）包裹装细管部分，但不可接触输精枪的末端或让纸巾接触到精液。

4.2.4.4输精操作

采用直肠把握输精。

4.2.4.5输精时间

发情后期到发情结束前，实践中如出现下面五种生理表现中的一种或几种即可判定为适时输精时间：

a)外阴部从肿胀到消退出现明显皱纹时；

b)阴道粘膜从粉红变为暗红（紫红）时；

c)阴道粘液从少到多，从稀变稠到浓稠或糊状时；

d)子宫颈口从开到微闭或关闭时；

d)卵巢上卵泡发育成熟，泡皮紧而薄，有一触即破之感时。

4.2.4.6输精次数

在基本掌握适时输精时间的情况下，一般输精2次，时间间隔8～12小时。对少数发情持续期较长或连续2个以上情期正常输精不孕的母牛，输精次数应增加到3～5次。

4.2.5异地输精

距离改良站点远或者山区交通不便的养牛户，配种员可以将冻精经恰当的方法解冻后携带进行输精。

（1） 38℃±2℃、10s常规解冻，解冻后将细管紧密包裹，置于人体内衣贴身口袋内，利用人的体温进行保存，运输到应用地点进行输精，精子存活有效时间可延长至4h，4h以内必须完成输精过程；

（2）10－15℃、10s低温解冻，4－5℃冰水混合物中低温保存，运到距离很远或到达后一定时间内方用的输精。精子存活有效时间可延长至8h。 

6 妊娠诊断

    母牛配种后应尽早进行妊娠诊断，确定是否妊娠，以采取相应措施提高受胎率和繁殖率。

6.1 直肠检查法

    如输精后2个情期不再返情，即可用直肠检查法进行妊娠诊断。

6.1.1保定好待检母牛，检查者剪短磨平指甲，穿上工作服，右手（有的人习惯用左手）戴上长臂手套并涂上肥作为润滑剂，左手抓住牛尾摆向一侧，右手五指并拢握成锥形经肛门伸入直肠，清除直肠内牛粪。

6.1.2首先找到子宫颈，按子宫颈、子宫体、子宫角间沟和子宫角的顺序检查子宫，然后再摸子宫中动脉及卵巢。

6.1.3诊断依据

以下五种检查结果，可以作为诊断母牛已妊娠的依据：

a)子宫和卵巢向前移至骨盆腔入口或腹腔内（但要注意非妊娠的老年母牛、患严重子宫疾病的牛子宫也可能坠入腹腔）。

b)孕侧卵巢表面有妊娠黄体存在。

c)孕侧子宫角增大，两个子宫位置、大小、形状及软硬度的对称状态消失。

d)子宫角间沟不明显或完全消失。

e)子宫内触摸到胎胞、子叶及胎儿，子宫中动脉出现特殊的怀孕脉搏。

6.2 B超仪诊断法

用兽用B超仪进行妊娠诊断，结果比较清晰、准确，一般在配种25天后即可进行。方法是将探头伸入直肠，探知胚胎的存在、胎儿心脏搏动、胎动和性别情况，判断是否妊娠及估算胎龄。

6.3 预产期推算

水牛的妊娠期平均为315天左右，其预产期的简便推算方法为配种月份减2，配种日期加10，不够减时往前借一年，超过30天时往后推一个月。

6.4久配不孕

人工授精和本交两个情期都配不上的母牛应及时查明原因，及时处理。

7 接产及初生犊牛护理

7．1 接产

7．1．1分娩预兆

在怀孕母牛预产期临近时，当观察到乳房膨大，外阴部肿胀，有浓稠粘液从阴门流出，尾根两侧下陷，活动困难，食欲减退，起卧不安，频频排尿，头不时回顾腹部，尾部不时高举等现象时，母牛将要分娩，应立即作好接产准备。

7．1．2接产准备

接产人员需准备的物品有：经过消毒的剪刀、消毒脐带用的碘酊、用于洗手的温开水、毛巾等。

7．1．3接产

如果母牛分娩顺利，接产人员只需耐心等待特牛的出生，然后进行称重、编号、记录,；如果发现母牛难产，需要及时查明难产原因并采取相应的助产措施。犊牛出生后及时清除口、鼻粘液，剥软蹄，用碘酒消毒脐带， 

7．2 初生犊牛护理

7.2.1哺喂初乳

在犊牛称重、编号及记录完成后，不挤奶的母牛及时让犊牛自然吮乳；挤奶母牛要及时挤奶喂给犊牛。人工哺喂初乳的量，一般是按犊牛出生重的1/10来掌握，第1次喂给2千克(要参照犊牛出生重的大小与生活力的旺盛情况，灵活掌握)；对体弱的犊牛可每天喂奶3次以上，对个别无法人工喂乳的犊牛，可让母牛自然哺乳。

7.2.2护理要点

7.2.2.1在犊牛出生后2小时内应哺喂第一次初乳和注射牲血素，保证犊牛获得足够的抗体蛋白量和铁元素补充。

7.2.2.2应给予保温、通风、光照及良好的舍饲条件，逐步培养犊牛对外界产生应答能力。7.2.2.3喂给犊牛初乳应用热水浴加温到36℃～38℃。如果犊牛食量大而奶温不太低时，计亦可直接向初乳中加入少量热水升温。要注意喂奶器具的卫生和消毒。

7.2.2.4如果用奶桶喂初乳时，应人工予以引导，一般是人将手指伸在奶中让犊牛吸吮，不论用什么工具喂奶都不得强行灌入。体弱牛或经过助产的牛犊，第一次喂奶大多数反应很弱，饮量很小，应有耐心在短时间内多喂几次，以保证必要的初乳量。

8 配种记录

无论采用本交还是人工授精配种，受配母牛的发情、输精、繁殖情况要逐头详细登记，做到一牛一卡。见附录B

8.1 建立母牛发情档案

输精员在每次配种时，要将每头母水牛的发情持续时间详细记录，建立该改良区域内母水牛的发情档案。

附　录　A：牛人工授精站（点）常用的设备、器械及药品

品  名	规  格	数  量	用  途
液氮罐	10升～30升	1个～2个	贮存冷冻精液
配种架	自  制	1个	保定母牛
生物显微镜	640倍	1台	检查精液品质
细管输精枪	0.25毫升	2支～3支	细管输精
普通冰箱	175升	1台	保存物品
消毒柜	双门式	1台	消毒器械
蒸馏水器	5升～10升/小时	1个	生产蒸馏水
牛开膣器	不锈钢	2个～3个	检查发情
瓷盘	50×55厘米	1个～2个	装器械
量  杯	500、1000毫升	2个～3个	量取溶液
量  筒	100、500毫升	2个～3个	量取溶液
载玻片	标准	20片	检查精液
盖玻片	标准	50片	检查精液
水浴锅		1个	解冻精液
细管剪刀		2把	剪细管封口
镊  子	20厘米	2把～3把	取冻精
温度计	1000C＜	2支～5支	测水温
酒精灯		1个	火焰灭菌
药物天秤	1克～100克	1台	称药物
酒  精	75%、95%		消  毒
毛  巾	中等长	10条	清洁
洗衣粉	500克		洗涤
氯化钠	500克	2瓶	配制生理盐水
高锰酸钾	500克	2瓶	消  毒

附录B：母牛人工授精登记卡

地址：                            填表日期：    年   月   日     畜主姓名：

品种

牛号或毛色

年龄

膘情

上次产犊日期

胎次

产后输精次数

母牛发情征状

性欲

外阴

粘液

子宫角

子宫颈

卵巢

输 精

输精日期

公牛名称

牛号

冻精批号、剂型、剂量

精子活力

输精员签名

妊娠检查

检查日期

年     月     日

产犊鉴定

产犊日期

年     月     日

检查方法

犊牛编号

检查结果

犊牛性别

预产日期

年     月     日

初生体重

检查人

鉴定人

备注