奶牛乳房炎的诊断和防治技术
(上传时间:2010-5-1 11:21:43 文章来源:奶牛疾病控制研究室 浏览次数 打印)收藏
奶牛乳房炎又名奶牛乳腺炎,是由物理、化学或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引发的一种炎症反应,其中多种病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因。该病影响世界奶牛业发展,也给乳品生产造成巨大损失。据世界奶牛协会统计,世界范围内奶牛乳房炎的发病率高达50%左右,我国奶牛隐性乳房炎的阳性率也在46.4~85.7%之间,不仅影响了奶牛养殖业、乳品工业的发展,也给公共卫生以及食品安全带来隐患。目前,普遍使用抗生素治疗奶牛乳房炎,但滥用抗生素产生的耐药性、药物残留、公共卫生等问题日益引起人们的关注。 一、乳房炎种类 根据乳房炎的临床表现和病程,临床上将乳房炎划分为临床型乳房炎和亚临床型乳房炎两种病型。 1、临床型乳房炎 临床型乳房炎是因感染导致的炎症反应,表现为乳汁颜色异常、结块,乳房组织肿胀、发热、疼痛、发红。如果临床症状仅局限于乳房局部,则称为温和乳房炎;如果临床上出现体温升高、厌食、休克等全身性临床症状,则称为重度乳房炎;如果重度乳房炎发病快,病例多,则称为急性乳房炎。 2、亚临床型乳房炎(隐性乳房炎) 少量的病例表现短暂的乳汁异常和乳房组织炎症,多数病例没有临床症状。如果感染持续2月以上,则称为慢性乳房炎。亚临床型乳房炎病程长,可持续整个泌乳期,甚至终身。亚临床型乳房炎的检测通过乳汁体细胞计数完成,乳汁体细胞计数(以嗜中性白细胞为主)与亚临床型乳房炎感染呈正相关,当乳汁体细胞计数≥ 280,000 细胞/mL时,亚临床型乳房炎感染的概率>80%,乳汁体细胞计数越大,亚临床型乳房炎发病率越高。 二、病原种类 微生物感染是引起奶牛乳房炎的主要原因,目前,已发现约150多种病原体可引起奶牛乳腺炎,其中包括细菌、病毒、支原体等。引起奶牛乳腺炎的病原体根据其来源和传播方式可分为传染性病原体和环境性病原体两类。一类是接触传染性病原微生物,植于乳腺并通过挤奶工或挤奶机传播,包括无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌和支原体;另一类是环境性病原体,包括大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌、沙雷氏菌、变形肝菌、假单胞菌,以及其它革兰氏阴性菌,凝固酶阴性葡萄球菌、环境链球菌、酵母菌、真菌、原藻属菌、化脓性放线菌及牛棒状菌,有些是由疱疹病毒和口蹄疫病毒所引起。上述病原体中,以金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌为主,约占奶牛乳房炎病例90%以上。 三、主要病原诊断技术 对于乳房炎的诊断,需要结合临床症状、体细胞计数、以及病原体的分离、鉴定,乳房炎常见主要病原分离、鉴定技术如下: (一) 葡萄球菌诊断技术 本菌属中引起乳房炎的主要是金黄色葡萄球菌,其所致乳房炎见于泌乳高峰期,常为慢性,也可呈急性。本菌经常存在于外界环境中,挤奶员的手、擦洗乳房用的布和消毒不严的挤奶杯是传播本病的主要媒介。 葡萄球菌和链球菌均为革兰氏阳性球菌,所以,首先进行革兰氏染色镜检,再按形态、培养特性、接触酶 (或称过氧化氢酶)实验结果,将葡萄球菌(接触酶阳性)和链球菌(接触酶阴性)初步分开。 1、样品收集 对检测有临床型乳房炎和隐性乳房炎的奶牛,常规挤奶消毒后,再用70%酒精棉球消毒乳头和挤奶人员手指,每乳头废弃头把奶后,收集5ml奶于经高压灭菌的l0ml塑料离心管中,低温运送至实验室。 2、病原菌分离培养 乳样摇匀后,每份乳样取50u1分别接种麦康凯平板、营养琼脂平板和5%兔鲜血平板, 3、病原菌鉴定 纯化培养物作革兰氏染色、镜检。根据不同的形态特征确定鉴定的生化指标。革兰氏阳性、成串聚集的球状菌,按葡萄球菌鉴定:检测触酶、凝固酶,用葡萄球菌属细菌生化鉴定管做初步生化鉴定;链状排列的革兰氏阳性球菌,按链球属细菌鉴定,检测触酶,用七叶甘、水杨苷、乳糖、血清菊糖、棉子糖、甘露醇、山梨醇、马尿酸盐、pH9.6肉汤、40%胆汁肉汤生化鉴定管进行生化鉴定;革兰氏阴性杆菌按肠杆菌鉴定,用肠杆菌科细菌生化常规签定管鉴定。 4、病原菌药敏试验 采用琼脂扩散敏感试验,链球菌用水解酪蛋白琼脂加5%脱纤维绵羊血平板,革兰氏阳性细菌的药敏片:头孢唑啉、头孢他啶、氟哌酸、链霉素、头孢哌酮、万古霉素、头孢三嗪、复方新诺明、青霉素、氯霉素、红霉素;革兰氏阴性细菌的药敏片:链霉素、复方新诺明、头孢三嗪、红霉素、呋喃妥因、四环素、氨苄青霉素、庆大霉素、卡那霉素、氟嗪酸、氟哌酸、万古霉素。试验结果依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准。 按下列标准诊断为葡萄球菌:能在普通琼脂培养基和在5%兔鲜血琼脂培 养基上形成的菌落较大,有些菌株的菌落周围呈现明显的溶血环,这些菌株染色镜检形态一致,呈葡萄串状或成双或单个的排列,接触酶试验阳性,能在7.5%氯化钠肉汤培养基中生长,多数能分解甘露醇、乳糖、葡萄糖等,致病菌株常为凝固酶阳性 。 (二) 链球菌诊断技术 本菌属感染的多无临床症状或症状不明显,大多数呈慢性经过,有时呈急-亚急性经过。也有出现严重症状的,但病程短,后遗症为乳腺萎缩和间质增生。 样品采集、病原菌的分离培养、鉴定、药物敏感试验方法同上(葡萄球菌诊断技术)。根据以下结果确定链球菌:在普通琼脂培养基上生长不良或不生长,在5%兔鲜血琼脂培养基上生长良好,多数致病性链球菌菌落周围有溶血环,其菌落很小 (约0.5~1 (三) 大肠杆菌诊断技术 大肠杆菌性乳房炎,多见于高产奶牛及产后泌乳高峰期,常呈最急性,病情急,病程短,可于数日死亡。常见乳房肿胀,并有毒血症症状、高热、精神委顿、食欲废绝、拉稀、乳汁水样黄色、迅速停止泌乳。溶血性大肠杆菌性乳房炎,预后不良,甚至死亡。 样品采集、病原菌的分离培养、鉴定、药物敏感试验方法同上(葡萄球菌诊断技术)。根据以下结果确定大肠杆菌菌:在普通琼脂培养基上、5%兔鲜血琼脂培养基上生长良好,在血琼脂平板上形成灰白、不透明、圆形、边缘整齐或不规则的大而湿润的菌落,一般不溶血,有些致病菌株可形成β溶血环;在麦康凯平板上形成较大的红色菌落。染色镜检形态基本一致为直径0.4~0.7—2~3um,散在或成对的革兰氏阴性杆菌。大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。吲哚和MR试验阳性,V-P试验阴性,氧化酶试验阴性,除少数菌株外,接触酶阳性。 四、预防措施 1、保持环境卫生和消毒 有效地减少、杀灭饲养和公共区域环境中病原微生物数量,是预防奶牛乳房炎的关键。卫生较差的环境是微生物繁殖的场所,也是隐性乳房炎感染的重要途径,因此,保持环境卫生是减少环境性病原菌如大杆菌、沙门氏菌、酵母菌、真菌、化脓性放线菌、病毒等病原微生物的最重要的措施。保持良好的环境卫生,防止细菌的繁殖是预防的关键。牛舍、运动场要清洁干燥,及时清理粪便、积水、泥泞。垫草应干、软、清洁,并且要经常更换。要定期对运动场和牛舍进行消毒(可每隔15天用消毒液喷雾消毒一次),乳房炎高发季节应加强消毒,保证有一个清洁卫生的环境。改善牛舍环境,使其通风性好、向阳性好。 2、保持牛体卫生 乳导管是传染性病原微生物侵入的主要渠道,而牛体不可避免的存在着大量的细菌,夏季可用喷淋的方法清洗掉大部分细菌,但其它季节唯一行之有效的办法就是药浴乳头,可靠的乳头药浴和乳头封闭大约能减少50—90%乳房炎的发病率。对较大的乳房,特别是下垂的乳房要注意保护,免受外伤。注意产后护理,尽量减少排除的分泌物对牛后躯的污染。做好夏防暑冬保温工作,减少应激反应,使牛生活在安静舒适的环境中。挤奶前,挤奶员的手和奶牛乳头要清洗消毒,挤奶前用0.1%的高锰酸钾或0.1%的新洁尔溶液擦洗浸泡乳头30秒钟,然后用单独的消毒毛巾或纸巾擦干,清洗乳头时应注意洗的面积不要太大,以免上部的脏物随流而下集中到乳头,增加乳房感染的机会。挤奶时,应先挤头胎牛或健康牛的奶,后挤有乳房炎牛的奶,对患有临床乳房炎的乳区停止用机器挤奶,有乳房炎牛的奶,一定要挤入专用的容器内,集中处理,以免交叉感染。挤奶后,要立即用3%次氯酸钠或0.5%洗必泰、0.1%雷夫奴尔、0.1%新洁尔灭等药浴液进行乳头药浴,封闭乳头。因为挤完奶15秒钟后乳头括约肌才能关闭乳头管的开口,在这15秒钟内,张开的乳头孔极易受到环境性病原菌的侵袭。消毒液要现用现配,并经常更换消毒液,以免菌株产生耐药性而影响消毒效果。尤其是以下三个时期,更应做好乳房的清洗消毒工作:①每年7、8、9月份温度高,湿度大,病原微生物繁殖能力增强,牛只感染机会增加;②第1、2个泌乳月时产奶量达到最高,母牛采食量增加,乳房负担大,乳房炎的发生率增高;③接近泌乳期结束时,由于长期挤奶,乳头管开放程度提高,外界病原菌易侵入乳房。 3、合理的挤奶方式 建立稳定的训练有素的挤奶员队伍,提高执行挤奶操作规程的自觉性。挤奶人员要温和地对待泌乳牛,挤奶时其乳头部分的神经末梢才能受到良性刺激,促使脑垂体释放催产素,催产素能促使乳汁排出。手工挤奶采取规范的握拳式,严禁使用滑榨法,人牛配合,减少应激。机械挤奶时防止过早地安装挤奶杯和随意延长挤奶时间。避免抽力过大,榨乳不完全和榨乳过度。 4、合理的饲料搭配和添加剂 合理的饲料搭配和营养水平,可保持奶牛的整体健康水平,增强抵抗力。建立青绿多汁饲料轮供体系,以奶定料,按牛给料,根据奶牛的营养需要给予全价日粮。研究表明,牛群乳房炎的发病程度与饲料中β-胡萝卜素、维生素A、维生素E、硒、锌及铜的水平有关。感染乳房炎的奶牛血浆及乳中β-胡萝卜素和维生素E的浓度均明显低于健康牛;奶牛乳腺感染程度越严重,其血浆β-胡萝卜素和维生素E的浓度就越低;牛乳中体细胞数及临床乳房炎的发生率均与其维生素E的摄入量及血浆硒浓度呈负相关,奶牛日粮中适量添加这些抗氧化性微量养分可增强奶牛对乳房炎的抵抗力;添加有机锌可减少乳中的体细胞数;铜在提高免疫力方面也有重要作用,缺铜可表现为胸腺萎缩、免疫细胞活性降低、抗体合成受损和抗体效价降低。 4、疫苗免疫预防 通过注射奶牛乳房多价灭活疫苗,可以提高奶牛机体对葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌的免疫力,免疫期为一个泌乳期。黑龙江省生物制品一厂生产的奶牛乳房炎多价灭活疫苗免疫程序为:怀孕母牛产前2个月首免,间隔30d进行2免,产后72 h内进行3免。正常泌乳牛在泌乳期免疫三次 ,每次间隔 21 d。每次在牛颈部皮下注射3 mL。 四、治疗措施 1、浸剂治疗 使用乳腺管浸剂对全群或者感染牛进行治疗,可使发病率明显下降,浸剂治疗需要对感染牛的4个乳头进行,以预防交叉感染。对于无乳链球菌引起的乳房炎,浸剂治疗治愈率达70-90%,治疗效果可通过体细胞计数和细菌培养进行监测,一般以30天为一个监测周期。对于治疗有益但尚未达到治疗标准的奶牛进行二次治疗,但对于对治疗无效的牛实施隔离、扑杀。浸剂治疗的缺点是对治疗有纤维素化和脓肿结节的乳房炎,效果不理想。 2、干乳期治疗 干乳期治疗是泌乳动物乳房炎治疗的关键,干乳期始于泌乳期的后1-2天,持续10-14天。在此期间,乳腺的生物化学、细胞学和免疫学特征发生明显的变化,治疗和自身免疫功能协同作用,疗效好,治愈率可达75%,费用比浸剂治疗低。充分利用干乳期对奶牛进行预防性的治疗,可以有效降低下一个泌乳期乳腺炎的发生。治疗隐性乳腺炎的最佳时期就是在干乳期,在这一时期即使使用较高剂量的抗生素也比较安全,而且抗生素在乳房组织中保持时间也较长。但应注意这一时期治疗并不能控制杆菌感染。干乳期治疗结束后,如果需要进一步治疗,可选择全身性疗法,而不要重复使用乳腺管浸剂治疗。 3、后备母牛治疗 后备母牛可通过接触乳房炎病牛的初乳、皮肤等感染乳房炎,相当比例的犊牛在产犊时已发生乳房炎。因此,在预产期前7-14天采用乳腺管浸剂治疗,可以显著地减少产时乳房炎发病率。该方法适用于第一胎产时乳房炎发病率高的牛群。 4、中草药治疗 天然中草药植物添加剂与抗生素类添加剂可竟相媲美,且具有抗生素不可替代的功能。其主要作用有:增强免疫功能,提高抗病力,抑菌抗病毒作用,增进食欲,提高营养物质的利用和促进生产,增强抗应激功能,提高畜产品质。配方中常用的金银花、蒲公英、大青叶、连翘、甲珠等具有清热解毒、抗菌消炎、消肿散结之功效;赤芍、当归、乳香、瓜蒌等具有活血散瘀、通经活血之功;王不留、青皮、通草等具有理气散结、活络下乳之效;黄芪益气补虚,可提高机体的非特异性免疫力;甘草调和诸药以增强药效。把以上药物合理配伍,治疗乳房炎的效果非常突出。 云南省现代农业奶牛产业技术体系奶牛疾病控制研究室
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