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    体外授精

    (上传时间:2009-11-20 9:45:27 文章来源:现代乳牛学  浏览次数  打印收藏


  •     体外受精就是从母体输卵管冲出的卵子,或者从卵巢的卵泡内取出卵子,使其在“试管”内,即在实验室条件下完成受精过程。体外受精可以利用卵巢内含有的潜在性卵子,比体内受精能够利用的卵子要多得多。1头母牛卵巢内含有几十万个卵原细胞,经处理激活后,如果能在体外条件下受精,则可大幅度地扩大了胚胎的来源,1头供体母牛所需的受体就不像现在只有10头左右,而是成千上万的牛群。体外受精可以将来自1头母牛的数个卵子同几头不同的公牛受精,这样,对母牛和公牛可以同时作后裔测定。据测算,1头公牛射出的精液可使3.6万个卵子受精,而一次公牛采出的精液一般只能生产500—600支细管冷冻精液。

      体外受精技术现已由实验动物扩展到大家畜和人类,已有20多种哺乳动物获得成功,其中兔(1959)、小鼠(1981)、大鼠(1974)、人(1978)、牛(1981)、山羊(1984)、绵羊(1986)、猪(1986)等已有正常的后代产生。张觉明博士(1959)在他的实验室内出生了世界上第一只体外受精小兔。他的一系列研究为“试管婴儿”的问世解决了关键性的理论和技术问题。近年朱裕鼎等用兔成熟卵母细胞和体内获能的精子进行体外受精,平均受精率为77.8%。 哺乳动物的体外受精和胚胎的体外培养技术,将为最大限度地提高哺乳动物的繁殖率做出贡献。

      体外受精技术的主要操作步骤如下:

      ①卵母细胞的采集和体外成熟培养:卵母细胞的采集可通过借助于超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜直接由活牛体的卵巢中吸取,也可进行超数排卵后由输卵管中冲出成熟的卵子,还可从屠宰后母牛的卵巢上采集卵母细胞。然后将卵母细胞放在体外成熟培养液中,在39℃、5%CO2气相条件下培养箱中培养,22~24小时后卵母细胞成熟准备与获能精子受精。

      ②精子获能:将解冻后的精子置于离心管中,用洗精液将精子稀释后离心两次,弃去上清液,制成精子悬浮液,精子密度调至4×106~6×106个/毫升,将其精液加入培养皿中的受精液小滴中,备精卵作用。

      ③受精:将上述成熟卵子移入精子受精液小滴中,经6~17小时后用吸管吹洗掉卵子周围的卵丘细胞,移入培养液中培养。

      ④体外受精卵的培养:由于早期胚胎有体外发育阻滞现象,一般多采用与卵丘细胞或输卵管上皮细胞等共培养的方法,培养发育到桑椹期或囊胚期。每48小时换液一次,每次换小滴50%的培养液

     

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