| 爱乳宝IgY抗体对奶牛乳房炎临床试验报告 | ||||||||||||||||||||||||||
爱乳宝IgY抗体对奶牛乳房炎临床试验报告
白文顺1 孙伟2 李书军2*
（1 云南农业大学动物科学技术学院 云南 昆明 650201
2 合肥雅莱生物工程有限公司 230000）
摘要：对山东、辽宁和安徽等地奶牛场进行乳房炎CMT检测，无菌收集患乳房炎的奶样，分离致病菌，选择致病力和理化性质最为典型的菌株作为抗原免疫蛋鸡，运用分子筛过滤卵黄液，获得浓度、纯度均较高的IgY抗体，商品名为爱乳宝。临床试验表明，爱乳宝对临床型乳房炎治愈率为76.5%，有效率为89.5%；对隐性乳房炎，头转阴率为87.9%，乳区转阴率为90.7%。
关键词：爱乳宝，IgY抗体，乳房炎
奶牛乳房炎是对奶牛生产危害性较大的疾病之一。有关资料表明，我国部分地区奶牛临床型乳房炎的发病率在5.38%～36%[1]，造成奶牛产奶量下降，病乳废弃，严重者可发生乳区化脓、坏炭疽、萎缩，致使奶牛永久丧失泌乳能力，使奶牛过早失去利用价值而被淘汰，其淘汰率占奶牛总淘汰率的9%～11%；隐性乳房炎在奶牛群中更为普遍，研究表明，不同程度的隐性乳房炎导致奶牛潜在奶产量损失在2.8～45.5%[2]。目前，乳房炎的治疗多采用抗生素及抗菌类化学药物，往往导致抗药性产生和药物残留及抗生素奶，严重地影响鲜奶品质和收购，造成很大的经济损失。针对上述问题，合肥雅莱生物工程有限公司研制出便于用药、适用奶牛乳房炎防治的新型、高效制剂—爱乳宝IgY抗体，它克服了常规抗生素、抗菌类化学药物制剂在应用中存在的局限性。该试验在前期试验的基础上，通过扩大试验规模，进一步评价和确定爱乳宝IgY抗体对奶牛临床型乳房炎及隐性乳房炎的临床效果，以期为今后新制剂的临床应用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品：爱乳宝IgY抗体（批号2768250，合肥雅莱生物工程有限公司研制）。
1.1.2 试验动物：从山东省、辽宁省和安徽省3个地区的奶牛养殖公司共9家奶牛场饲养的荷斯坦牛群中 ，选取420头年龄3~6岁，胎次2~4胎，经临床诊断和CMT检查确诊为临床型乳房炎和隐性乳房炎的奶牛，其中，临床型患牛162头，隐性型患牛258头。
1.2 方法
1.2.1 临床型乳房炎诊断标准；按病情分为轻度和重度两种类型。
轻度：乳汁中有絮片、凝块，有时乳汁呈水样；乳房轻度发热和疼痛或不发热不痛，肿胀。
重度：患病乳区肿胀、热、硬、痛。乳汁异常，分泌减少，出现体温高、病牛抑郁、食欲减退等全身症状。
1.2.2 分组与处理：将3个地区的奶牛养殖公司不同时期发生的不同程度临床型乳房炎患牛162头，按轻度和重度进行统一归类、分组和登记；通过CMT检测为阳性的258头牛，不分阳性强弱程度均按阳性处理，然后分别按20ml/乳区的剂量连用三天，观察试验结果。
1.2.3 试验投药方案：爱乳宝IgY抗体均采取乳室内推注方法给药。所有患牛给药前应将乳室内乳汁挤干净，然后按推荐剂量于患牛乳室内一次性推注药物20ml，同时进行乳房按摩数分钟，使药物充分分散。每日一次，连续用药3d为一个疗程。然后每天观察和记录患牛乳房的局部和全身反应和变化，观察7d。
1.2.4 疗效判定标准
1.2.4.1 观擦指标
乳房局部观察：乳房大小、硬度、局部温度、肿胀和疼痛反应等。
全身反应观察：体温、呼吸数、反刍、食欲、鼻镜和精神状态等，观察给药期间及给药后有无局部刺激性反应及局部或全身性过敏反应，记录反应开始时间，持续时间，程度，处理过程及转归等。
乳汁状态观察：乳汁颜色，粘稠度，有否凝块，血丝等异形物，产量变化等。
1.2.4.2 临床型疗效判定：治疗一个疗程后，根据临床症状和乳汁状态的改变进行疗效判断。
对治疗效果按痊愈，好转，无效三级评定[3]。
痊愈：全身症状消失，产奶量恢复，乳房、乳汁恢复正常
好转：全身症状消失，乳房、乳汁状态好转或基本消失，产奶量有所回升。
无效：全身症状未见改善，乳房乳汁症状未改善或变化。
按下面公式计算有效率：
有效率=痊愈数+好转数/总病例数*100%
1.2.4.3 隐性乳房炎疗效判定：根据诊断标准，确定用药前后阳性程度的转化情况，以转阴率判定药物的疗效。计算公式为：
头转阴率（%）=给药前阳性总头数-给药后阳性总头数/给药前阳性总头数*100%
乳区转阴率（%）=给药前阳性乳区总数-给药后阳性总头数/给药前阳性乳区总数*100%
1.2.4.4数据整理与统计分析：对试验数据进行x2检验，分析实验药物相同处理对不同程度临床型乳房炎及隐性乳房炎的有效性及不同程度乳房炎对疗效的影响。
2试验时间
该试验在2012年6月～2012年8月，整个试验周期为90天。
3结果分析
3.1 实验药物对奶牛的安全性
所有经爱乳宝IgY抗体治疗的病例，均未观察到全身及局部刺激性过敏。
3.2 对爱乳宝IgY抗体奶牛临床性乳房炎的治疗效果
3.2.1 爱乳宝IgY抗体对不同程度的临床性乳房炎治疗效果：爱乳宝IgY抗体对不同程度的临床性乳房炎治疗效果见表1。从表1可以看出，爱乳宝IgY抗体按相同剂量给药1个疗程后，治愈共124头，总治愈率为76.5%，有效145头，总有效率为89.5%。经统计分析表明，不同程度的乳房炎对药物疗效有及其显著的影响（p<0.01）。从实际治疗情况来看，爱乳宝对轻度的临床性乳房炎有较高的治愈和有效率，而对重度临床性乳房炎治疗效果略差。
表1 爱乳宝IgY抗体 对不同程度临床乳房炎的治疗效果
3. 爱乳宝IgY抗体对奶牛隐性乳房炎的治疗效果，爱乳宝IgY抗体对隐性乳房炎的治疗效果见表2。从表2可以看出，爱乳宝IgY抗体按相同剂量1个疗程3次给药后，阳性牛只头数由给药前的258头降低到给药后的31头，头转阴率为87.9%；阳性乳区数有846个降低到78个，乳区转阴率为90.7%。爱乳宝IGY抗体乳房局部给药对隐性乳房炎具有显著的治疗效果。
表2爱乳宝IgY抗体对隐性乳房炎的治疗效果
4 讨论
4.1 目前对乳房炎的治疗多采用抗生素等化学药物乳房内灌注，虽然可达到杀菌，消除病原的目的，却起不到乳房损伤的恢复作用，治疗后患病乳区产量明显下降。同时抗生素等抗菌药物成分单一，细菌易产生耐药性并存在药物残留和抗生素奶的弊端，而抗体可以直接黏附于病原菌的细胞壁上，改变病原菌细胞的完整性，干扰细菌代谢从而致细菌死亡[4,5]。特异性IgY抗体能定向杀灭引起乳房炎的无乳链球菌、停乳链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等；特别是还能有效杀灭抗生素对其无能为力的支原体以及L-型耐药变种菌和其它耐药菌。由于这种特异性IgY抗体只杀灭病原体，对牛乳房内的乳酸杆菌等有益菌却秋毫无犯[6]。更重要的是，使用这种特异性IgY抗体有助于恢复有益菌良好的生长微环境，构建有益菌群，从而形成乳房炎致病菌无法再生存的新的菌群生态平衡，达到牛乳房炎不再复发的效果。
4.2 采用爱乳宝1个疗程3次乳房局部给药，对轻度临床性乳房炎的治愈率和有效率高，对重度乳房炎效果略差，分析其原因与乳房炎患牛发病时间长或是多次复发的，腺体组织炎性损伤严重，恢复慢有直接的关系。因此，在生产实际中应及早对发病牛进行治疗，对严重的病例应适当增加给药剂量和疗程，以提高治疗效果。
5 参考文献
[1] 罗金印,郁杰,李宏胜,李新圃.我国部分地区个体奶牛场乳房炎发病率的调查研究[J]中国牛业科学,2009,5:70-73[2]王赟.奶牛乳腺炎多联疫苗的研制[D].山西：西北农林科技大学：2004[3]蒋司嘉,张继恩,等.重组溶葡萄球菌酶对奶牛乳房炎的疗效研究[J]中国兽药杂志,2011,4 (12):23-28[4] Hoon H. Sunwoo, Eun N. Lee,etc. Growth Inhibition of Escherichia coli 987P by Neutralizing IgY Antibodies[J] The Open Immunology Journal, 2010, 3:1-8[5] Taisuke Fujibayashi, Moriyuki Nakamura,etc. Effects of IgY against Candida albicans and Candida spp. Adherence and Biofilm Formation[J] Jpn.J.Infect.Dis.2009,62:337-342[6] Zhen YH,Jin LJ, Efficacy of specific egg yolk immunoglobulin (IgY) to bovine mastitis caused by Staphylococcus aureus[J] Vet Microbiol.2009,2:317-322 |