邓川黑白花奶牛同情发情及胚胎移植试验报告

摘要:邓川黑白奶牛是地方新品种,数体大,分布广。通过对邓川黑白奶牛开展同情发情及胚胎移植试验,求得适合当地奶牛的同情发情及胚胎移植方法。

1 当地牛胚胎移植情况。邓川黑白奶牛是云南省地方品种,该品种是在上世纪50年代开始,以当地乳用黄牛品种邓川牛为母本,引入黑白花奶牛种公牛,开展杂交改良,经过不断选育而成。邓川黑白花奶牛存栏在15万头左右,中国西部地区多数奶牛都有含其血液成分。牛胚胎移植是一项新育种技术,是快速提高良种化的很好途径。尽管奶牛胚胎移植推广多年,但基层畜牧兽医部门能够掌握该项技术的人员较少,特别县乡两级尤为突出,影响奶牛胚胎移植的推广应用。为提高育种技术,开展同情发情及胚胎移植试验,让基层畜牧科技人员进一步了解奶牛胚胎移植,掌握技术要领,部分人员在老师专家的指导下初次完成移植少数胚胎。

2 受体牛及材料

2.1 试验地点和时间。地点在洱源县凤羽、茈碧湖、三营3个镇乡奶牛养殖区,时间201210月至20138月。

2.1.2 材料。CIDR栓、CIDR枪、PGF2α注射液、1%普鲁卡因注射液,10ml 注射器、一次性针头、新洁尔灭溶液、酒精棉球、塑料桶3个、毛巾2条、直检手套、凡士林、纸巾。

2.2.3 受体母牛准备。待选受体牛品种为邓川黑白奶牛,以18月龄~24月龄的育成牛为主。体格较大,后躯发育好;膘情中等,体重350 kg以上;健康(无传染病、生殖道疾病、肢蹄病等);性周期正常,发情表现良好。胎次为0,已有2次发情期未配种,生殖器官正常(包括阴道、子宫和卵巢),乳房发育良好。在开展移植前10天,由改良点技术人员调查统计、登记。待选受体母牛数通常是移植胚胎数的5倍,本次试验有159头待选。

2.2.4 奶牛胚胎。由大理州家畜繁育指导站从外地购买34枚奶牛冷冻胚胎,品种为荷斯坦,运输至洱源县奶牛改良点备用。

3 方法及步骤

3.1 受体母牛初步筛选。通知养殖户、场,按规定时间,把待选母牛牵拉到各改良点。保定后,向畜主询问基本信息,了解年龄大小和饲养管理情况,评定体型、体重,检查子宫、卵巢形状、大小、质地,卵巢在长2cm、宽2cm 、厚1cm(直径)以上。生殖器官正常无疾病者留用,异常者淘汰。

3.2 同期发情处理。采用CIDR+PGF2α法诱导处理,使母牛群体在相对集中时间内发情。对每头初选合格的母牛,用新洁尔灭溶液清洗外阴部,酒精消毒;用新洁尔灭溶液对CIDR枪消毒,将阴道栓装入CIDR枪,将CIDR栓置入母牛阴道,保留1020cm尾线。从埋植当日起开始记时,该日为第1天。在第8天,对每头母牛注射PGF2α注射液0.6mg。在第10天,取出CIDR;在第11天~13天,要每天定时观察母牛发情情况并记录;在第18天~20天每天检查生殖道及卵巢及黄体,判定是否可作为授体母牛,以及确定移植时间。当上卵巢上的黄体大小超过1cm(直径),坚实有弹性、轮廓明显,体积占卵巢 1/3以上时,就达到移植条件。

3.3移植。

3.3.1 受体母牛准备。母牛常在注射PGF2α后3天开始出现发情症状,主要表现为鸣叫,烦躁 不安,相互爬垮,阴门流出粘液,尿频, 外阴肿胀、潮红 ,见红粘液等。发情后6—8天(多数在第7)卵巢上出现黄体,黄体明显突出卵巢表面,顶部有冠状开口,直径大于1.5cm,弹性好。保定好母牛,在受体牛百会穴硬膜外麻醉,即1—2尾椎间剪毛消毒,注射普鲁卡因4ml。固定尾巴,清洗、擦拭外阴部。

3.3.2 解冻胚胎。从液氮中取出细管冷冻胚胎细管,在空气中保持6秒钟,使液氮充分挥发,放入35℃温水中放置20秒钟后取出,左手持细管,以右手的拇指和中指轻弹数次,把空气排到上端,剪切口,将装有胚胎的细管装上移植枪,在移植枪套上硬外套,用塑料环卡紧,再套上保护膜软外套。

3.3.3 一只手穿戴塑料手套,伸入直肠,把握住子宫,另一只手持移植枪插入母牛阴道,顺着子宫颈、子宫体、子宫角,当移植枪头部达到有黄体一侧子宫角的上1/3—1/2处(子宫大弯)时,轻推移植枪,把胚胎移植到母牛子宫角内,然后轻轻拔出移植枪,让母牛休息片刻。

4 移植后饲养管理

4.1 登记检查。记好移植时间、品种,胚胎的各种信息。移植2个月后,进行是否着床及妊娠检查,确诊为妊娠,每头注射黄体酮2ml,推算预产期,记录入表格。

4.2 饲养管理。做到规范饲养管理,环境清洁,饲草、饲料结构合理,饮水要新鲜,补充食盐和必要的添加剂。分群合理,防止过挤,避免机械性流产。 长期舍饲的母牛要注意加强运动。防止在移植前后因饲料及环境改善造成的应激反应。

5 结果及分析

5.1 结果结论。对邓川黑白花奶牛同期发情处理,移植34枚荷斯坦奶牛,妊娠16头,妊娠率为47.1%。产犊11头,产犊率68.6%。本次奶牛胚胎移植得到完成,达到预期效果。

同期发情结果(头)

待选受体母牛数

初选母牛数

CIDR栓埋植数

发情数

有黄体数

可移植母牛数

153

96

60

44

41

34

 

妊娠及产犊结果(头、%

移植数

2个月内妊娠数

妊娠率

2个月内流产数

流产率

280天后产犊数

产犊率

其中;1、母犊数

2、公犊数

34

16

47.1%

5

31.25%

11

68.6%

6

5

5.2 结果分析

5.2.1 发情率高。待选母牛153头,初选96头,再经综合检查、筛选后,对60头母牛移置CIDR栓, 44头出现发情,发情率73.3%CIDR+PGF2α法对邓川黑白花奶牛诱导发情效果显著,可成为将来同情发情胚胎移植首选方法,还可应用于同情发情人工授精。

5.2.2 妊娠率高。在34头邓川黑白花奶牛移植胚胎,妊娠率为47.1%,高于41%平均水平。说明此次试验技术方案成熟,技术路线合理。全部选用了育成母牛,减少了隐性子宫内膜炎对胚胎附植的影响。以邓川黑白花奶牛作受体母牛开展胚胎移植,同其它品种相比,差异不大。

5.2.3 有可供示范的良种犊牛群。产犊11头,给养殖场户增加繁殖6头后备良种奶牛,5头肉用公牛。这批胚胎源于纯种荷斯坦奶牛,从犊牛阶段就可看出乳用特征明显;将来能有较高的产奶量,给当地养殖场提供优秀个体实物,以示范带动提高良种意识。

5.2.4 给当地培养了技术人员。当地有10人参加受体母牛初选,有3人全程跟踪观摩,有1人,在老师专家手帮手指导下,独立完成移植6枚胚胎,有2头妊娠。当地技术人员得到实践操作,有了信心,为将来独立承担牛胚胎移植打下了基础。

6 讨论

6.1育成牛为受体。子宫内膜炎是影响胚胎附植及妊娠率的主要因素,一旦有炎症,机体就把炎性分泌物和胚胎当成异物将以排斥。经产母牛产后胎衣血污排不干净,人工授精器械消毒不严,常发生子宫内膜炎。另外,常发生营养失衡,微量元素不足,导致卵巢及黄体发育不良,奶牛的生殖机能异常,不利于胚胎着床及妊娠。育成牛为授体,减少宫内膜炎发病率,减少排斥因素。育成牛不产犊,不产奶,不易发生营养代谢性疾病,生殖系统机能正常,利于胚胎着床。

6.2 体成熟为标准。母牛性成熟时,有些器官还发育不成熟,不具备着着床及妊娠条件,或妊娠后胎儿发育、母体自身发情都有影响。检查时要看年龄,不低于18个月龄;看体重,不低于350公斤;看子宫状况,发育良好对称;看卵巢,大小正常。每个环节都要细致认真检查,严格筛选,好中选好。待选母牛群体要多,以15最好。

6.3 同情发情效果好。对初选母牛进行同情发情处理,在集中时限内移植,省力省时。阴道栓CIDR埋置,诱导发情,注射PGF2α溶解黄体,发情率高,发情状态好。对于缺乏技术,异地聘请技术人员,是较好的方法。

6.4 加大技术培训。奶牛胚胎移植工程生产和使用已明确分工,冷冻胚胎已批量化生产,商品化出售。冷冻胚胎移植技术程序相似于人工授精,不同点在于排卵后第6-8天(多应用7天),触摸黄体大小、质地进行判断;只要对人工授精技术熟练的人员开展培训,就能掌握技术。鼓励养殖场购买奶牛胚胎,聘请当地技术人员到场进行移植,实现奶牛胚胎移植技术的普及化。

6.5 自然发情成本低。以孕激素+PGF2α法进行诱导同期发情,效果显著,但移植前处理费用高,每头药费800-1300元。如牛群数量大,有技术人员,可用自然发情,不需生殖激素处理,一旦有发情母牛及时检查,及时移植,成本减少。

6. 6 经产母牛也可作为受体。如果受体母牛少,育成牛有特殊用途,可选择1-4胎经产母牛为受体。须防治子宫内膜炎,开展布病监测,及时淘汰阳性牛,净化牛群。分娩前饲喂牛羊舔砖和营养舔砖,补充硒等矿物质。产后灌服益母生化散:益母草120g、当归75g、川芎65g、桃花70g、干姜55g,根据情况可加减党参,黄芪,温水灌服,每天一次,连用3-4天。同时子宫内灌注宫净康,或(青霉素钠、硫酸链霉素注射液、硫酸庆大霉素注射液、乳酸环丙沙星注射液、头孢曲松钠、盐酸左氧氟沙星、土霉素。)。或用催产素,氯前列醇钠,加速排胎,恢复子宫及卵巢机能。

6.7 饲养管理不可忽视。在移植后2个月内,有5头奶牛发生流产,流产率31.25%,这可能与饲养管理不当有关。对于受体母牛,外来胚胎是异物;胚胎着床是一个复杂过程,任何刺激,都会引起应激反应,加大排斥,导致胚胎流出,出现流产。移植后,除给优质饲料,合理搭配外,尽量避免受体母体受到打击、碰撞、跌倒、惊吓,圈舍潮湿,饮冷水,不要注射、投服胎动药。妊娠检查后,注射黄体酮50100mg保胎。有些妊娠母牛在2个月内,会出现假发情,暂不要配种,要进一步观察。